๐ŸซงELISA์‹คํ—˜, ํ…Œ์ด๋ธ” ์œ„์—์„œ ๊ฐ„ํŽธํ•˜๊ฒŒ ์ž๋™ํ™” ํ•˜์„ธ์š”

ELISA ์‹คํ—˜์„ ์ž๋™ํ™”ํ•˜๊ณ  ์‹ถ์ง€๋งŒ ๋Œ€ํ˜• ์žฅ๋น„ ๋„์ž…์ด ๋ถ€๋‹ด์Šค๋Ÿฝ๊ฑฐ๋‚˜ ์ž๋™ํ™”๋ฅผ ์ฒ˜์Œ ์‹œ๋„ํ•ด๋ณด๋Š” ์—ฐ๊ตฌ์‹ค์ด๋ผ๋ฉด, ์ž‘๊ณ  ์‹ค์šฉ์ ์ธ ์ž๋™ํ™” ์žฅ๋น„๋ถ€ํ„ฐ ์‹œ์ž‘ํ•˜๋Š” ๊ฒƒ์ด ๊ฐ€์žฅ ํ˜„๋ช…ํ•œ ์„ ํƒ์ผ ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.

NOTABLE์€ ์†Œํ˜•(Tabletop) ๋ฆฌํ€ด๋“œ ํ•ธ๋“ค๋Ÿฌ๋กœ, ๋ณต์žกํ•œ ์„ค์น˜ ์—†์ด ํ…Œ์ด๋ธ” ์œ„์— ์˜ฌ๋ ค ๋ฐ”๋กœ ์‚ฌ์šฉํ•  ์ˆ˜ ์žˆ๋Š” ์ž๋™ํ™” ์žฅ๋น„์ž…๋‹ˆ๋‹ค. 
์™„์ „ ์ž๋™ํ™”๋ฅผ ์œ„ํ•œ ๊ณ ๊ฐ€์˜ ๋Œ€ํ˜• ์‹œ์Šคํ…œ์ด ๋ถ€๋‹ด๋˜๋Š” ๊ฒฝ์šฐ, ELISA ์‹คํ—˜์˜ โ€˜ํ•ต์‹ฌ ํ”ผํŽซํŒ… ๋‹จ๊ณ„โ€™๋ถ€ํ„ฐ ์ž๋™ํ™”ํ•˜์—ฌ ์‹คํ—˜์˜ ์ •ํ™•์„ฑ๊ณผ ํšจ์œจ์„ฑ์„ ๋†’์ด๋Š” ๋ฐ ์ตœ์ ํ™”๋œ ์†”๋ฃจ์…˜์ž…๋‹ˆ๋‹ค.

โ‘  ํ•ญ์›/ํ•ญ์ฒด ์ฝ”ํŒ… (Plate Coating)
  • 96-well ํ”Œ๋ ˆ์ดํŠธ์— ํ•ญ์›(๋˜๋Š” ํ•ญ์ฒด) ์šฉ์•ก์„ ๊ท ์ผํ•œ ๋ณผ๋ฅจ์œผ๋กœ ์ž๋™ ๋ถ„์ฃผ ๊ฐ€๋Šฅ
  • 8์ฑ„๋„ ํ—ค๋“œ๋กœ ํ•œ ๋ฒˆ์— ์—ฌ๋Ÿฌ well์— ์ •ํ™•ํžˆ ๋ถ„์ฃผํ•˜์—ฌ ์‹คํ—˜ ์†๋„ ๋ฐ ์ •๋ฐ€๋„ ํ–ฅ์ƒ
  • ์ˆ˜๋™ ํ”ผํŽซํŒ… ๋Œ€๋น„ CV ๊ฐ’(๋ณ€๋™๊ณ„์ˆ˜)์„ ๋‚ฎ์ถ”๊ณ  ์žฌํ˜„์„ฑ
๐Ÿท๏ธ์˜ˆ) ์ŠคํŒŒ์ดํฌ ๋‹จ๋ฐฑ์งˆ 100ฮผL์”ฉ 96๊ฐœ ์›ฐ์— ์ฝ”ํŒ…ํ•  ๊ฒฝ์šฐ โ€“ ์ˆ˜๋™๋ณด๋‹ค ๋น ๋ฅด๊ณ  ์ผ์ •ํ•˜๊ฒŒ ๋ถ„์ฃผ ๊ฐ€๋Šฅ

โ‘ก ์ƒ˜ํ”Œ ๋ถ„์ฃผ (Sample Addition)
  • ํ˜ˆ์ฒญ, ํ˜ˆ์žฅ ๋“ฑ ์ƒ˜ํ”Œ์„ well์— ์ž๋™ ๋ถ„์ฃผ
  • ์—ฌ๋Ÿฌ ๊ฐœ์˜ ์ƒ˜ํ”Œ์„ ๋น ๋ฅด๊ฒŒ ์ฒ˜๋ฆฌํ•˜๋ฉด์„œ ๋ณผ๋ฅจ ํŽธ์ฐจ ์ตœ์†Œํ™”
  • ํฌ์„ ์‹œ์•ฝ์„ ํฌํ•จํ•œ Sample preparation์—๋„ ํ™œ์šฉ ๊ฐ€๋Šฅ
  • Serial dilution ์ž๋™ํ™” ๊ฐ€๋Šฅ
  • ๋‹ค์–‘ํ•œ Tube rack ๊ฐ€๋Šฅ
๐Ÿท๏ธ ์ •ํ™•ํ•œ ํ˜ˆ์ฒญ ๋†๋„๋ณ„ ๋ถ„์ฃผ๋ฅผ ํ†ตํ•ด ๋ฐ์ดํ„ฐ ๊ฐ„ ์‹ ๋ขฐ๋„ ํ–ฅ์ƒ

โ‘ข 1์ฐจ/2์ฐจ ํ•ญ์ฒด ๋ถ„์ฃผ (Antibody Addition)
  • Blocking ํ›„, 1์ฐจ ํ•ญ์ฒด ๋˜๋Š” 2์ฐจ ํ•ญ์ฒด๋ฅผ ์ž๋™์œผ๋กœ ๋ถ„์ฃผ
  • ELISA์—์„œ ํ•ญ์ฒด ๋ฐ˜์‘์˜ ๊ท ์ผ์„ฑ ํ™•๋ณด๊ฐ€ ์ค‘์š”ํ•˜๊ธฐ ๋•Œ๋ฌธ์— ์ž๋™ํ™” ์‹œ ํฐ ํšจ๊ณผ
  • ์ˆ˜๋™ ์‹คํ—˜๋ณด๋‹ค ํ•ญ์ฒด ๋ถ„์ฃผ ์‹œ ์‹œ๊ฐ„/์†๋„/์ˆœ์„œ ์ฐจ์ด ์ค„์ด๊ธฐ ์šฉ์ด
๐Ÿท๏ธ Detection Antibody(HRP-conjugated) ๋ถ„์ฃผ ์‹œ ์ •ํ•ด์ง„ ์‹œ๊ฐ„ ๋‚ด ๋ถ„์ฃผ ์™„๋ฃŒ ๊ฐ€๋Šฅ

โ‘ฃ Substrate ๋ถ„์ฃผ
  • Substrate ๋ฐ˜์‘ ์ „์šฉ well์— ์ •ํ™•ํ•œ ์–‘์˜ Substrate ์šฉ์•ก ๋ถ„์ฃผ ๊ฐ€๋Šฅ
  • ์‹คํ—˜์ž๊ฐ€ ์ง์ ‘ ํƒ€์ด๋ฐ ๋งž์ถฐ ๋ถ„์ฃผํ•˜์ง€ ์•Š์•„๋„ ๋˜๋ฏ€๋กœ, ๋ฐ˜์‘ ์‹œ์ž‘ ํƒ€์ด๋ฐ์„ ์ผ์ •ํ•˜๊ฒŒ ์œ ์ง€ ๊ฐ€๋Šฅ
๐Ÿท๏ธ ๋ชจ๋“  well์— ๋™์ผํ•œ ์‹œ๊ฐ„ ์ฐจ๋กœ Substrate๋ฅผ ๋ถ„์ฃผํ•˜๋ฉด ๊ฒฐ๊ณผ ํŽธ์ฐจ ์ตœ์†Œํ™” ๊ฐ€๋Šฅ
ELISA ๋‹จ๊ณ„ ๋งค๋‰ด์–ผ ํ”ผํŽซํŒ… NOTABLE ์ž๋™ํ™”
ํ•ญ์›/ํ•ญ์ฒด ์ฝ”ํŒ… ์—ฐ๊ตฌ์ž๊ฐ€ ์ง์ ‘ ๋ถ„์ฃผ ๊ท ์ผํ•œ ๋ณผ๋ฅจ์œผ๋กœ ์ž๋™ ๋ถ„์ฃผ
์ƒ˜ํ”Œ ๋ถ„์ฃผ ํ”ผํŽซํŒ… ์†๋„ยท๋ณผ๋ฅจ ํŽธ์ฐจ ๋ฐœ์ƒ ๊ฐ€๋Šฅ ์ •ํ™•ํ•œ ๋ณผ๋ฅจ์œผ๋กœ ์ž๋™ ๋ถ„์ฃผ (CV ๊ฐ’ ์ตœ์†Œํ™”)
ํ•ญ์ฒด ๋ถ„์ฃผ (1์ฐจ/2์ฐจ) ์‹œ๊ฐ„์ฐจ, ์˜ค์ฐจ ๊ฐ€๋Šฅ ์ผ๊ด€๋œ ์กฐ๊ฑด์œผ๋กœ ์ž๋™ ๋ถ„์ฃผ
TMB ๊ธฐ์งˆ ๋ถ„์ฃผ well ๊ฐ„ ๋ถ„์ฃผ ์‹œ๊ฐ„์ฐจ ๋ฐœ์ƒ ๋™์ผํ•œ ํƒ€์ด๋ฐ์œผ๋กœ ์ž๋™ ๋ถ„์ฃผ

๐Ÿง™์—์ด๋ธ”๋žฉ์Šค์˜ ๋ฆฌํ€ด๋“œ ํ•ธ๋“ค๋ง ๋กœ๋ด‡ ๋…ธํ„ฐ๋ธ”์€ ์ด๋ ‡๊ฒŒ ๋„์šธ ์ˆ˜ ์žˆ์–ด์š”.

โ• ์ƒ˜ํ”Œ์„ ์ผ์ •ํ•œ ์†๋„์™€ ์••๋ ฅ์œผ๋กœ ๋ถ„์ฃผํ•˜์—ฌ CV๊ฐ’์„ ์ตœ์†Œํ™”ํ•  ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.
โ• ์—ฐ๊ตฌ์ž๊ฐ€ ์‹คํ—˜๋งˆ๋‹ค ๊ฐ™์€ ์†๋„๋กœ ํŒŒ์ดํŽซํŒ…ํ•˜๊ธฐ ์–ด๋ ค์šด ๋ฌธ์ œ๋ฅผ ํ•ด๊ฒฐํ•˜์—ฌ ๋ฐ์ดํ„ฐ์˜ ์žฌํ˜„์„ฑ์„ ๊ทน๋Œ€ํ™”ํ•  ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.
โ• ์ผ์ •ํ•œ ํŒŒ์ดํŽซํŒ… ๋ณผ๋ฅจ์„ ์œ ์ง€ํ•˜์—ฌ ์‹คํ—˜ ๊ฐ„ ํŽธ์ฐจ๋ฅผ ์ค„์ด๊ณ , ELISA ๋ฐ์ดํ„ฐ์˜ ์‹ ๋ขฐ๋„๋ฅผ ํ–ฅ์ƒ์‹œํ‚ต๋‹ˆ๋‹ค.
๋งค๋‰ด์–ผ ํŒŒ์ดํŽซํŒ… ๋ฐฉ์‹์—์„œ๋Š” ์—ฐ๊ตฌ์ž๊ฐ€ ์ง์ ‘ ์ƒ˜ํ”Œ์„ ์˜ฎ๊ฒจ์•ผ ํ•˜๋ฏ€๋กœ, ๊ฐ™์€ ์‹คํ—˜์„ ์ˆ˜ํ–‰ํ•˜๋”๋ผ๋„ ์—ฐ๊ตฌ์ž์— ๋”ฐ๋ผ ์‹คํ—˜ ์˜ค์ฐจ๊ฐ€ ๋ฐœ์ƒํ•  ๊ฐ€๋Šฅ์„ฑ์ด ๋†’์Šต๋‹ˆ๋‹ค. ํ•˜์ง€๋งŒ NOTABLE์„ ์‚ฌ์šฉํ•˜๋ฉด ๊ฐ™์€ ๋ณผ๋ฅจ์„ ๋™์ผํ•œ ์†๋„๋กœ ์ •๋ฐ€ํ•˜๊ฒŒ ๋ถ„์ฃผํ•  ์ˆ˜ ์žˆ์–ด ์‹คํ—˜์˜ ์ผ๊ด€์„ฑ์„ ์œ ์ง€ํ•  ์ˆ˜ ์žˆ์Šต๋‹ˆ๋‹ค.

๋ฐ์ดํ„ฐ ๋ถ„์„์— ์ง‘์ค‘ํ•˜์„ธ์š”. ๋ฐ˜๋ณต ์ž‘์—…์€ NOTABLE์ด ํ• ๊ฒŒ์š”!

์†Œ๊ทœ๋ชจ ์—ฐ๊ตฌ์‹ค์—์„œ๋„ ์‰ฝ๊ฒŒ ๋„์ž…ํ•  ์ˆ˜ ์žˆ๋Š” ์ž‘์ง€๋งŒ ๊ฐ•๋ ฅํ•œ ์ž๋™ํ™” ์†”๋ฃจ์…˜,

์ง€๊ธˆ ๋‚ด ํ…Œ์ด๋ธ”์— NOTABLE์„ ๋ฐ๋ ค์˜ค์„ธ์š”!

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